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1.之操作技術(shù)的影響
   ① 應(yīng)保證清潔，整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確。
   ② 合理安排檢測量，ELISA試劑盒以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
   ③ 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
   ④ 用洗板機(jī)洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。 ① 嚴(yán)重溶血：以HRP為標(biāo)記的ELISA試劑盒測定中，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性，催化底物顯色造成假陽性；
   ② 混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈
   ③ 如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)；
   ④ 標(biāo)本凝固不全，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強(qiáng)行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA試劑盒測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果；
   ⑤ 采血試管洗滌不*、反復(fù)使用易交叉污染
   ⑥ 塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ，樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。
    血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測，嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，標(biāo)本在冰箱中保存時間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合，使間接法的 試劑 本底加深。ELISA試劑盒超過一周測定的需-20℃保存。